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RAW264.7細胞轉染操作步驟在已經發表文章中的經驗分享介紹
發布時間： 2021-07-20 點擊次數： 3015次
石河子大學動物科學與技術學院，在2021年發表文章到Frontiers in Immunology的學術期刊中科研者使用美國zeta life轉染試劑，高效率轉染質粒DNA和siRNA到RAW264.7細胞，具體轉染RAW264.7細胞方法經驗如下：（注意：本文轉染實驗中使用的細胞數量、試劑用量和操作方法不適用于傳統lipo3000轉染試劑或類似產品）
All plasmids and siRNAs (20 uM/uL) were transfected using the Advanced DNA RNA Transfection Reagent™ (ZETA LIFE，USA) according to the manufacturer’s protocol. Briefly,RAW264.7 cells were planted on the cell culture plate one day in advance, the cell confluence degree was up to 60 – 80 % at the time of transfection, plasmid or siRNA was directly mixed with transfection reagent according to 1:1 relationship, then mixed by blowing into a pipette for 10 – 15 times. Following incubation at room temperature for 10-15 minutes, the complex was added to the cell culture plates, mix 148 gently, and incubated in the CO2 incubator for 24h. All the siRNAs were designed by Gene Pharma transfection efficiency was measured using 150 qRT-PCR.
Zeta Life介紹：
美國 Zeta Life 公司成立于 1989 年，是國際無血清細胞培養基 DMEM/F12 主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養基、以及干細胞、免疫細胞及腫瘤細胞等多種不同類型哺乳動物細胞的無血清培養液生產經驗；也是目前世界胎牛血清、無血清培養基最大的 OEM 供應商之一；每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫師檢驗證明及品質測試報告；ZETA LIFE 血清在 100 級的無菌間采用全自動方式制造生產，具有良好的可再現性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區聯合開發用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑，此技術成為新的全球蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。
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